一種高效的萊茵衣藻電轉化方法
劉佳; 何炫程; 項晨; 馬伯寧; 韋航濤; 楊明峰 北京農學院生物科學與工程學院; 農業部華北都市農業重點實驗室; 北京102206
關鍵詞：萊茵衣藻 電轉化 融合基因 綠色熒光蛋白 巴龍霉素
摘要：【目的】為了探明萊茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii最佳的轉化條件。【方法】將融合基因4CL-3a-STS與綠色熒光蛋白(GFP)分別作為目的基因,以aphⅧ為抗性基因,采用電轉化法將兩種目的基因分別轉入野生型(WT)萊茵衣藻和細胞壁缺失型萊茵衣藻(CC425)中。【結果】用巴龍霉素抗性篩選以及通過PCR驗證與熒光共聚焦顯微鏡檢測,證實目的基因在兩種萊茵衣藻中成功表達。【結論】獲得了一種高效的萊茵衣藻電轉化方法,野生型衣藻轉化率為11.07%,細胞壁缺失型衣藻轉化率為49.67%。
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