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表達(dá)H9亞型禽流感病毒HA蛋白的重組耐熱新城疫病毒株的雞胚傳代研究

唐國(guó)毅; 商雨; 李林濤; 任助; 李麗; 王紅琳; 羅青平; 曾馳; 溫國(guó)元 武漢輕工大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院; 湖北武漢430023; 農(nóng)業(yè)部畜禽細(xì)菌病防治制劑創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 湖北武漢430064; 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所; 湖北武漢430064

關(guān)鍵詞:新城疫 重組病毒 耐熱選育 雞胚傳代 

摘要:新城疫和禽流感嚴(yán)重危害世界養(yǎng)禽業(yè),對(duì)其防控在我國(guó)主要依賴疫苗接種。課題組前期獲得了一株可表達(dá)H9亞型禽流感病毒HA蛋白的重組耐熱新城疫病毒rTS-HA株。進(jìn)一步對(duì)其雞胚傳代特性進(jìn)行研究,旨在分析重組新城疫病毒在傳代過(guò)程中的熱穩(wěn)定性和外源基因表達(dá)穩(wěn)定性。將其在SPF雞胚傳至18代,每隔4代耐熱選育1次,取中間代次毒株,測(cè)定其增殖效價(jià)、雞胚最小致死劑量的平均死亡時(shí)間(mean death time,MDT),同時(shí)設(shè)置未耐熱選育的對(duì)照。結(jié)果表明,通過(guò)耐熱選育將rTS-HA株傳至第18代后,其增殖滴度未發(fā)現(xiàn)顯著變化,MDT均大于120 h,表明毒力無(wú)返強(qiáng)現(xiàn)象,但其耐熱性有顯著提升,而未進(jìn)行耐熱選育的雞胚傳代株的耐熱特性顯著下降。動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明,耐熱選育后毒株的免疫效果較初代毒株也有明顯的提升。以上結(jié)果表明重組新城疫病毒rTS-HA株需要進(jìn)行耐熱選育傳代,才能保持其耐熱特性,同時(shí)其免疫原性也有一定的提升,可作為新城疫和禽流感二聯(lián)耐熱基因工程活疫苗的候選毒株。

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