種間雜交選育新型產脂蛹蟲草
關鍵詞：蛹蟲草 深黃被孢霉 雜交 原生質體融合
摘要：為選育能夠合成蟲草素又能高效積累油脂的新型蛹蟲草菌株,將高產蟲草素的蛹蟲草FY1421及高效合成油脂特別是不飽和脂肪酸的深黃被孢霉菌株Z0108進行原生質體融合。對親本的原生質體的形成與再生、雙親滅活及融合的條件進行了篩選與優化,并結合96微孔板初篩和搖瓶發酵復篩,獲取融合子。結果表明:蛹蟲草菌株FY1421采用1.5%溶壁酶+0.5%蝸牛酶+0.5%纖維素酶的混合酶液處理120 min,原生質體數量最多,再生率最高;深黃被孢霉菌株Z0108采用1%溶壁酶+1%蝸牛酶+1%纖維素酶的混合酶液處理4 h,原生質體數量最多,再生率最高;FY1421原生質體采用60℃水浴熱滅活10 min,Z0108原生質體采用紫外線滅活30 s,均可達到100%的滅活率;滅活雙親在35℃下,使用40%的PEG促融10 min,融合效率最高。從650株融合子篩選得到融合菌株RCS262,其搖瓶發酵蟲草素含量達5926μg·g^-1,油脂含量達到37.5%。采用原生質體融合技術進行蛹蟲草與深黃被孢霉的種間雜交,成功獲得融合菌株既能高產蟲草素,也具有高效積累油脂的能力。
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