伽馬射線輻射結(jié)合亞硝基胍誘變選育他克莫司高產(chǎn)菌株
關(guān)鍵詞：鏈霉菌 他克莫司 發(fā)酵 輻射誘變 亞硝基胍
摘要：為了選育穩(wěn)定高產(chǎn)的他克莫司菌株,提高發(fā)酵水平,對他克莫司出發(fā)菌株采用450 Gy劑量的^60Co γ輻射誘變及3 mg/mL亞硝基胍(NTG)處理30 min誘變,并分別結(jié)合鏈霉素和慶大霉素進(jìn)行抗性篩選.經(jīng)選育獲得一株高產(chǎn)、遺傳穩(wěn)定的他克莫司突變株FIM-17-17,該菌株的搖瓶發(fā)酵水平較出發(fā)菌株提高了65%.考察該突變株的穩(wěn)定性,及樹脂AB-8、D101、HT60、XAD16、HP20和XDA-8對發(fā)酵水平的影響,并在容量1 t的發(fā)酵罐進(jìn)行中試發(fā)酵驗證.結(jié)果表明,突變株FIM-17-17遺傳穩(wěn)定,且在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加2%的D101樹脂后,發(fā)酵水平又提高了29.8%,發(fā)酵罐中試發(fā)酵水平平均達(dá)1 319 μg/mL.結(jié)果提示,利用^60Co γ射線輻射和NTG復(fù)合誘變能有效獲得他克莫司高產(chǎn)菌株.
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