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小鼠小梁細胞與肌成纖維細胞的同步輻射紅外顯微光譜

何明霞; 田甜; 劉立媛; 步紹翀; 東莉潔; 張欣欣; 張洪楨 天津大學測試計量技術及儀器國家重點實驗室; 天津300072; 天津大學精密儀器與光電子工程學院; 天津300072; 天津大學光電信息技術教育部重點實驗室; 天津300072; 天津大學化學工程國家重點實驗室; 天津300072; 天津醫科大學眼科醫院; 天津300384

關鍵詞:同步輻射紅外顯微成像 原發性開角型青光眼 小梁網細胞 肌成纖維細胞 彈性蛋白 

摘要:原發性開角型青光眼是常見的致盲性眼部疾病。眼壓升高是原發性開角型青光眼發生和發展最主要的危險因素,是由小梁網途徑的房水外流排出系統發生病變、房水流出阻力增加所致。研究表明,房水中存在的轉化生長因子-β能夠使小梁細胞纖維化,誘導小梁細胞過度增殖,從而阻礙房水外流,導致原發性開角型青光眼的發生。原發性開角型青光眼發病隱蔽,病程進展緩慢,早期沒有任何癥狀,往往到晚期視力視野有顯著損害時,才會被發現,因此原發性開角型青光眼的早期診斷尤為重要。同步輻射紅外顯微成像結合高亮度、高分辨率的同步輻射源,同時配備傅里葉變換紅外光譜儀與紅外顯微鏡,可以實現細胞的檢測。這對從分子層面獲取細胞的變化信息,深入理解疾病的發病機制以及疾病的早期診斷具有非常重要的意義。雖然有很多紅外光譜在生物醫學領域的研究報道,但是應用紅外光譜顯微成像技術研究細胞等生物醫學體系仍然是亟待發展的領域,并且目前未找到關于紅外光譜用于小梁網細胞的檢測報道。在體外用轉化生長因子-β對老鼠小梁網細胞進行誘導,使其轉化為肌成纖維細胞,模擬小梁細胞纖維化過程。對小梁網細胞以及經轉化生長因子-β誘導形成的肌成纖維細胞進行同步輻射紅外顯微成像及光譜分析,并進一步探討同步輻射用于早期診斷原發性開角型青光眼的可行性。研究表明肌成纖維細胞內的彈性蛋白明顯高于小梁網細胞,而彈性蛋白中95%為非極性氨基酸,即氨基酸的側鏈基團R基只有C和H兩種元素。對比兩種細胞的紅外譜圖,發現在2 934,2 900和2 845cm^-1,肌成纖維細胞的CH3,CH2和CH的伸縮振動明顯強于小梁網細胞,推測可能是由于轉化生長因子-β誘導后細胞內彈性蛋白增加所致。在細胞層面檢測了小梁網細胞的過度增殖,為將來可以直接獲取細?

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