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產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌的分離篩選與鑒定

吳自祥; 萬(wàn)學(xué)瑞; 馬亞茹; 王艷; 吳潤(rùn); 王川; 魏姣; 劉磊; 張小麗; 張?zhí)炝? 楊潤(rùn)霞; 賈曉蕊 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院; 甘肅蘭州730070

關(guān)鍵詞:纖維素酶 16s rdna 分離 鑒定 

摘要:通過(guò)篩選獲得高產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌菌株,為纖維素酶制劑研制及纖維素酶工程菌構(gòu)建提供試驗(yàn)材料。采用剛果紅平板從牛羊糞便及腐敗的玉米秸稈和木屑中分離產(chǎn)纖維素酶菌株,以DNS法測(cè)定酶活,根據(jù)酶活復(fù)篩產(chǎn)纖維素酶分離菌株;觀察分離菌株的形態(tài)、染色與培養(yǎng)特性;應(yīng)用16S rDNA通用引物擴(kuò)增菌株基因組DNA,測(cè)序結(jié)果提交GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行Blast比對(duì)分析和相似性搜索,作出復(fù)篩菌株種的鑒定。結(jié)果表明:分離獲得16株纖維素酶產(chǎn)量較高的細(xì)菌菌株,均為革蘭氏陽(yáng)性菌,菌體呈短桿狀、具中央芽孢,經(jīng)16S rDNA序列比對(duì)分析和相似性搜索,鑒定為10株枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、6株解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)。

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