大腸桿菌角鯊烯合成途徑的構建與調控
張亦男; 劉振; 毛相朝 中國海洋大學食品科學與工程學院; 青島266000; 青島海洋科學與技術國家實驗室海洋藥物與生物制品功能實驗室; 青島266000
關鍵詞：大腸桿菌 角鯊烯 異戊二烯途徑 代謝調控 培養條件優化
摘要：角鯊烯因其具有良好的抗氧化功能而被廣泛應用于食品、醫藥、化妝品、工業應用等領域。本實驗在大腸桿菌中構建角鯊烯合成途徑,通過對其合成途徑中關鍵限速酶(1-脫氧-D-木酮糖-5-磷酸合酶和異戊烯基二磷酸異構酶)過表達的方法進行初步調控,使角鯊烯的產量提升了近三倍。之后采用單因素試驗對其發酵培養基和培養條件進行優化,以此來提高角鯊烯的產量。優化發酵條件后,使用最優發酵培養基——TB培養基,在最佳發酵條件:37℃,220r/min培養至OD600約為1.2時加入終濃度為0.1mmol/L的IPTG誘導劑,25℃條件下誘導48h,角鯊烯產量可達73.88mg/L。
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