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microRNA-100對胰腺癌細胞侵襲和轉移能力的影響及機制

黃巍; 孫誠誼; 喻超; 潘耀振; 田舍; 張乙凡; 陳世裕; 江建新 貴州醫科大學附院肝膽外科; 貴州貴陽550004; 貴州醫科大學肝膽胰脾重點實驗室; 貴州貴陽550004; 武漢大學人民醫院; 湖北武漢430060; 湖北省消化病學研究所; 湖北武漢430060

關鍵詞:胰腺腫瘤 侵襲 轉移 

摘要:目的:探討miR-100對胰腺癌細胞在體外侵襲和遷徙能力的影響及其機制。方法:采用實時熒光定量聚合酶連反應(qRT-PCR)檢測miR-100在6株人胰腺癌細胞系及1株人正常胰腺上皮細胞系中的表達,選取表達差異較明顯的PANC-1和MIA PaCa-2細胞系進行后續實驗;針對miR-100設計miR-100 mimic和空載體(NC),并轉染上述兩株細胞系中,用PCR檢測轉染效率;Transwell實驗及劃痕實驗檢測miR-100對胰腺癌細胞侵襲轉移能力的影響,免疫熒光檢測miR-100對胰腺癌細胞骨架的影響,Western blot檢測轉染細胞后FZD-8的表達。結果:PCR實驗顯示miR-100在胰腺癌細胞系中低表達,在正常胰腺上皮細胞系中高表達,所設計的miR-100 mimic可以有效地升高PANC-1和MIA PaCa-2細胞系中miR-100的表達;Transwell實驗及劃痕實驗顯示轉染miR-100之后,能有效的抑制胰腺癌細胞的侵襲及遷移能力(P〈0.05);免疫熒光顯示轉染miR-100后,F-肌動蛋白(F-actin)減少;Western blot結果顯示,轉染miR-100后,FZD-8的表達減少,胰腺癌細胞的侵襲轉移能力明顯降低。結論:上調miR-100后,胰腺癌細胞可能通過下調FZD-8的表達來抑制其侵襲轉移的能力,提示miR-100有望成為胰腺癌治療的潛在靶點。

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