miR-150在骨髓間充質干細胞分化中的作用及其可能的機制
關鍵詞：bmscs
摘要：目的采用去卵巢法建立骨質疏松模型,并研究模型中miR-150的表達情況及其影響骨質疏松過程的可能機制。方法選取C57BL/6J采用卵巢摘除法建立骨質疏松模型,micro CT檢測模型中骨質情況,并分離BMSCs細胞,流式細胞儀檢測BMSCs表面抗原檢測結果,MTT生長曲線和克隆形成情況鑒定BMSCs細胞增殖情況,RT-PCR檢測模型中miR-150、RUNX-2的表達情況,轉染miR-150 mimics和inhibitor后RT-PCR和Western Blot檢測細胞中RUNX-2的表達情況,成骨誘導及堿性磷酸酶(ALP)染色和茜紅素檢測不同處理組成骨能力變化情況。結果處理2個月后實驗組骨小梁明顯減少,稀疏,斷裂,骨含量下降;BMSCs克隆數(shù)及細胞增殖能力6 d、8 d后顯著降低,miR-150內(nèi)源性表達異常升高,兩組BMSCs表型CD29、CD44陽性,CD34、CD45陰性。模型建立成功后,實驗組中RUNX-2表達顯著降低,inhibitor抑制miR-150表達后,RUNX-2表達升高,miR-150 mimics組結果變化趨勢與miR-150 inhibitor組相反。與對照組相比,mimics組ALP染色結果變淺,表達降低,而inhibitor組染色變深,表達升高。結論在成骨誘導過程中,miR-150可作為成骨負性調控因子,通過影響RUNX-2的表達影響成骨分化。
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