三角帆蚌dPGAM基因的克隆與表達分析
關鍵詞：三角帆蚌 磷酸甘油酸變位酶 克隆 表達
摘要：為探究貝類磷酸甘油酸變位酶(PGAM)基因的功能,以紫色和黃色家系三角帆蚌為試驗材料,采用RACE-PCR法克隆得到三角帆蚌1個輔因子依賴型磷酸甘油酸變位酶基因(dPGAM)的cDNA序列,命名為HcdPGAM,并對其進行生物信息學和表達特性分析。結果表明,HcdPGAM基因包含1個750 bp的開放閱讀框,編碼1個含250個氨基酸的假定蛋白,并含有1個保守的組氨酸磷酸酶結構域;HcdPGAM與其他動物PGAM的氨基酸序列均具有較高的相似性(58.8%~82.0%)。實時熒光定量PCR分析顯示,HcdPGAM在所檢測的紫色蚌和黃色蚌的鰓、外套膜、閉殼肌、消化腺、性腺組織和血淋巴細胞6種組織中均有表達,其中在閉殼肌中的表達量相對較高,且紫色系蚌閉殼肌中的表達水平顯著高于黃色系,表明該基因與三角帆蚌的能量代謝與生長發育有關,是貝類分子輔助育種的一種潛在的標記;嗜水氣單胞菌誘導可極顯著上調HcdPGAM基因的表達水平(24 h和48 h),表明HcdPGAM基因在貝類抗細菌感染的免疫反應相關能量代謝過程中也發揮著重要作用。本研究結果為明確貝類PGAM的功能和篩選三角帆蚌不同顏色家系間的特異性分子標記提供了一定的理論依據。
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