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高表達OAZI-1的小鼠乳腺癌4T1細胞誘導抗腫瘤免疫應答的實驗研究

楊建林; 王艷林; 呂亞豐; 魏木蘭; 曹春雨 三峽大學醫學院腫瘤微環境與免疫治療湖北省重點實驗室; 宜昌443002

關鍵詞:乳腺癌細胞 抗腫瘤免疫 

摘要:目的在細胞和實驗動物水平上分析高表達OAZI-1對小鼠乳腺癌4T1細胞誘導抗腫瘤免疫應答的影響。方法RT-PCR和Western blot用于鑒定高表達OAZI-1的4T1細胞(4T1/OAZI-1);流式細胞儀檢測Mφ下同和DC對4T1細胞的吞噬率以及成熟DC標志性表面分子的表達水平;ELISA檢測細胞培養上清和小鼠血清中IFN-γ和TNF-α含量。用4T1/OAZI-1和4T1/3.1對照細胞分別接種Balb/c小鼠后,觀察接種瘤的生長狀況及荷瘤小鼠的生存期。結果1)成功構建OAZI-1高表達的4T1/OAZI-1細胞株;2)M?和DC對4T1/OAZI-1細胞的吞噬率(10.8%,58.4%)顯著高于對照細胞(6.3%,19.6%);3)將DC與4T1/OAZI-1共孵育后,CD40、CD80和CD86(成熟DC細胞表面標志分子)表達陽性的DC比率(62.8%、77.9%和75.1%)顯著高于和對照細胞共孵育的DC(43.9%、57.5%和49.6%);4)將4T1/OAZI-1活化的DC與Balb/c小鼠脾淋巴細胞共孵育后,細胞培養上清中IFN-γ含量(28.7 pg/ml)顯著高于對照細胞(19.4 pg/ml);5)將4T1/OAZI-1和4T1/3.1細胞分別接種Balb/c小鼠右前肢腋窩皮下,小鼠體內4T1/OAZI-1接種瘤的生長速度顯著低于對照細胞接種瘤,其生存期和血清TNF-α和IFN-γ水平也明顯高于接種對照細胞的小鼠。結論高表達OAZI-1的小鼠乳腺癌4T1細胞能更有效地被抗原提呈細胞識別、吞噬并誘導T淋巴細胞活化與成熟,誘導機體的抗腫瘤免疫應答,抑制接種瘤在動物體內的生長。

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