通過RNAi技術下調OsLOX提高水稻種子耐儲性
關鍵詞：水稻 耐儲性 轉基因 rna干擾技術 脂氧合酶
摘要：[目的]本文旨在通過RNAi技術下調OsLOX提高水稻種子耐儲性,增強其在老化處理后的種子活力。[方法]利用RNA干擾(RNAi)技術,下調水稻品種‘寧粳1號’脂氧合酶基因(LOX)的表達,對轉基因后代進行多年分子鑒定及生理生化特征和農藝性狀考察。[結果]獲得了穩定含有目的片段且不含潮霉素基因的2個改良家系XO3和XO6,與‘寧粳1號’相比,改良系中OsLOX2和OsLOX3表達量顯著降低;經10個月自然放置和7 d人工老化處理,改良系脂氧合酶和丙二醛含量均顯著低于受體親本‘寧粳1號’,其脂氧合酶含量為0.094~0.111 ng·mL-1、丙二醛含量低于4 nmol·mg^-1,而‘寧粳1號’分別為0.115 ng·mL-1和6 nmol·mg^-1;老化后‘寧粳1號’發芽率只有31%,而改良系發芽率在70%以上;TTC染色后還原得到的2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTCH)含量和發芽速率也表明改良系的種子活力顯著提高;老化后,改良系的種子淀粉含量和膠稠度變化幅度小于‘寧粳1號’。此外,改良系的分蘗數和有效穗數明顯增加但結實率降低。[結論]通過RNA干擾技術降低‘寧粳1號’中OsLOX2和OsLOX3基因的表達,提高了‘寧粳1號’的耐儲性,為耐儲藏水稻分子育種提供材料基礎。
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