貽貝足絲蛋白的汞、鎘抗性及富集機制
關鍵詞：基因工程 翡翠貽貝 足絲蛋白 基因克隆 轉錄組學
摘要：為探究貽貝足絲蛋白黏附重金屬的機理及分子機制,對翡翠貽貝足絲蛋白進行轉錄組測序分析,使用Trinity軟件從頭組裝,獲得73 571個UniGenes.翡翠貽貝足部的UniGenes注釋到基因本體(gene ontology,GO)數據庫,共獲得9 466個注釋結果,通過基因組百科全書(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)數據庫注釋后,發現有955個UniGenes被注釋到關于黏著斑蛋白的通路中,推測足絲蛋白吸附重金屬的功能與其密切相關.由于Pvfp6半胱氨酸、組氨酸和酪氨酸含量高,該蛋白可能對重金屬有結合作用。將 pvfp6 基因克隆到pET-30a表達載體,轉到大腸桿菌BL21 (DE3)表達。結果表明,含有pET-30a-pvfp6 質粒的宿主具有一定的抗汞和抗鎘能力,能分別在含Hg^2+質量濃度為5mg/L,或者含Cd^2+質量濃度為160 mg/L的培養基中生長;重組菌對Hg^2+和Cd^2+的平衡富集量均高于對照組pET-30a,分別為109.89 mg/g和19.27mg/g.研究表明,足絲蛋白Pvfp6賦予了重組菌具有一定的抗汞和抗鎘的能力,且富集能力增強.該研究可為海洋環境中重金屬污染的生物治理奠定實驗基礎。
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