嗜熱脂肪芽孢桿菌( Geobacillus stearothermophilus )來源耐熱β-半乳糖苷酶BgaB轉糖苷催化活性改造
董藝凝; 陳衛; 陳海琴; 趙建新; 陳永泉; 張灝 滁州學院生物與食品工程學院; 安徽滁州239000; 江南大學食品學院; 食品科學與技術國家重點實驗室; 江蘇無錫214122
關鍵詞：低聚半乳糖 轉糖苷活性 嗜熱脂肪芽孢桿菌 定點突變 化學修飾
摘要：該研究以GH42家族嗜熱脂肪芽孢桿菌(Geobacillus stearothermophilus)來源耐熱β-半乳糖苷酶BgaB為研究對象,針對其轉糖苷活性弱的問題,采用定點突變與化學修飾相結合的方法,對其預測親核催化位點Glu303進行了功能研究與分子改造。所得突變體Ox-E303C與野生型酶相比,可將低聚半乳糖合成量由0%提高到11.5%。研究結果表明對耐熱β-半乳糖苷酶BgaB親核催化位點進行半胱氨酸亞磺酸(—SOO-)替換,能夠提高其轉糖苷催化活性。該研究對GH42家族β-半乳糖苷酶轉糖苷催化功能的分子改造具有廣泛的參考價值。
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