酶高效表達體系構建及高通量篩選關鍵技術
林影; 韓雙艷; 袁清焱; 李承 華南理工大學生物科學與工程學院; 廣州510006
關鍵詞：酶分子高效表達 菌株構建 高通量篩選技術
摘要：酶作為生物催化劑已被廣泛地應用于醫藥、食品、化工、能源及輕工業等領域,隨著低碳經濟發展及綠色制造的發展需求,酶制劑應用領域不斷拓展。隨著當今生命科學前沿技術飛速發展,生物信息學、分子進化、基因組學和蛋白質組學等先進技術被應用于新酶分子的挖掘與改造。而代謝工程及反應過程工程成為酶制劑發酵生產調控的關鍵。同時,酶制劑高效表達菌株及其高通量篩選技術平臺的構建也是新酶發現與工業化生產的重要橋梁。本文從酶高效表達載體和宿主出發,重點介紹了高效表達體系的構建原理和方法,包括重組酶表達載體表達元件的優化、重組酶基因表達量的增加、提高酶蛋白質的折疊通量、優化蛋白分泌運輸途徑、降低蛋白降解途徑的作用、初級代謝途徑的優化等。還總結了高效菌株的篩選方法,并展開合理預測。
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