菊花CmDREBa-2基因的功能驗證
關鍵詞：菊花 遺傳轉化 功能驗證
摘要：為探究CmDREBa-2基因的抗性功能,了解CmDREBa-2調控菊花參與高、低溫防御反應及響應白色銹病的分子機制,構建了過表達載體pBI121-CmDREBa-2,利用農桿菌介導法轉化菊花'C029'。對轉基因植株進行45℃高溫、-4℃低溫及接菌處理后,觀察表型并分析下游基因表達量。結果表明:PCR檢測共獲得2個陽性植株,半定量與qRT-PCR表明CmDREBa-2成功高表達。在45℃的高溫脅迫處理下,轉基因株系存活率顯著高于野生型,并顯著提高了熱脅迫基因CmHsp90、CmHsfA2、活性氧清除基因SOD的表達。低溫脅迫處理下,轉基因株系OE-5,OE-8的存活率分別為90%和85%,而野生型僅為10%,同時,抗寒相關基因COR413、COR6.6和抗逆基因rd29a的表達較處理前升高,且高于野生型。接種白色銹病病原菌32h時,轉基因株系中CmDREBa-2的表達量激增,同時CmDREBa-2的過表達也不同程度地促進了病程相關基因PR1和PDF1.2的表達。其中,PR1基因的表達更為明顯。綜上,CmDREBa-2可能直接或間接調控脅迫相關基因增強菊花對高溫脅迫和低溫脅迫的耐受性。CmDREBa-2通過SA介導的抗病信號途徑,參與菊花抵抗白色銹病反應。
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