無血清培養(yǎng)基對(duì)深低溫凍存復(fù)蘇后的間充質(zhì)干細(xì)胞免疫功能的研究
關(guān)鍵詞：臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 無血清培養(yǎng)基 細(xì)胞凍存 細(xì)胞復(fù)蘇
摘要：目的:探討無血清培養(yǎng)基對(duì)凍存后的間充質(zhì)干細(xì)胞(HUC-MSCs)免疫調(diào)節(jié)功能的影響,明確其成脂成骨生物學(xué)特性,為臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。方法:(1)分離臍帶中的HUC-MSCs,傳代純化后深低溫凍存。(2)凍融后的HUC-MSCs分別以含10%胎牛血清的培養(yǎng)基(SCM),無血清培養(yǎng)基兩種培養(yǎng)條件培養(yǎng)。(3)觀察兩組細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),革蘭染色計(jì)數(shù),計(jì)算細(xì)胞活率。(4)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)兩組細(xì)胞的表面標(biāo)志物。(5)成脂成骨誘導(dǎo),茜紅素染色和油紅染色觀察誘導(dǎo)情況。結(jié)果:(1)兩組細(xì)胞均以漩渦狀貼壁,無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞體積略小。(2)在細(xì)胞總數(shù)及活性方面,兩組細(xì)胞有些微差異,可忽略不計(jì)。(3)流式細(xì)胞術(shù)顯示其對(duì)PE-CD34不表達(dá),對(duì)PE-CD105、PE-CD90、PE-CD73、PE-CD44和PE-CD29高表達(dá)。(4)對(duì)無血清培養(yǎng)基(SFM)所培養(yǎng)得到的HUC-MSCs歷經(jīng)約21 d的成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞專向分化誘導(dǎo),發(fā)現(xiàn)其具有可媲美SCM培養(yǎng)的HUC-MSCs的分化能力。結(jié)論:無血清培養(yǎng)基同有血清培養(yǎng)基相比,對(duì)深低溫凍存復(fù)蘇后的間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能無明顯差異,可替代有血清培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
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