構建表達Flag-GPI的重組乙型肝炎病毒載體
胡孔穎; 谷陳建; 吳敏樂; 陶帥; 劉楠楠; 劉晶; 謝幼華 復旦大學上海醫學院基礎醫學院病原生物學系; 教育部、衛健委、醫科院醫學分子病毒學重點實驗室; 上海200032; 上海市浦東醫院; 復旦大學附屬浦東醫院檢驗科; 上海201399
關鍵詞：乙型肝炎病毒 5c3c 糖基磷脂酰肌醇 重組乙型肝炎病毒載體
摘要：乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是小型的嗜肝DNA病毒,能夠特異性地感染人肝實質細胞。HBV的易感性可以歸于多個方面,包括細胞表面的受體以及細胞內的蛋白或其他因子,目前對HBV易感性的了解還有待深入。本課題利用課題組原有的HBV 5c3c載體和糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)的特性,構建了重組HBV載體5c3c-CD59-Flag-GPI和5c3cT-Flag-GPI,轉染Huh7細胞后可以將Flag標簽錨定在細胞膜上,且可利用Flag抗體通過流式細胞術對其進行分選。在回補HBV包膜蛋白的情況下,5c3cT-Flag-GPI能包裝形成完整的重組HBV顆粒。本研究為后續優化重組HBV的包裝效率,進而為HBV易感性研究提供工具并奠定基礎。
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