Lewis肺癌細胞培養上清液通過調控糖酵解途徑增強小鼠髓源性抑制細胞的免疫抑制功能
關鍵詞：腫瘤微環境 糖酵解
摘要：目的探討Lewis肺癌細胞培養上清(TCCM)對髓源性抑制細胞(MDSC)代謝和功能的影響。方法免疫磁珠法分離Lewis肺癌移植瘤小鼠脾臟MDSC,用小鼠TCCM處理MDSC 48 h后,實時熒光定量PCR檢測MDSC中乳酸脫氫酶A(LDHA)及葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)、缺氧誘導因子1α(HIF-1α)mRNA的水平,己糖激酶(HK)法檢測葡萄糖濃度,乳酸檢測試劑盒檢測糖酵解途徑終產物乳酸含量,羧基熒光素二乙酸鹽琥珀酰亞胺酯(CFSE)染色結合流式細胞術檢測MDSC對CD4^+T細胞增殖的抑制作用,精氨酸酶1(ARG1)檢測試劑盒檢測MDSC的ARG1活性,一氧化氮試劑盒檢測誘導型一氧化氮合酶(iNOS)的分泌水平。結果與未處理組相比,TCCM處理過的MDSC糖酵解途徑關鍵酶LDHA的mRNA水平及糖酵解途徑相關蛋白GLUT1、HIF-1α的mRNA水平明顯上調,MDSC分泌的免疫抑制性效應分子ARG1的活性和iNOS的分泌量顯著增加,MDSC對CD4^+T細胞增殖的抑制作用明顯增強。結論TCCM能夠激活MDSC的糖酵解途徑,上調其對CD4^+T細胞增殖的抑制作用及免疫抑制效應分子的釋放。
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