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釉基質(zhì)蛋白誘導(dǎo)不同生理性根吸收期乳牙牙周膜干細(xì)胞向成牙骨質(zhì)細(xì)胞方向分化的研究

句新科; 周至斐; 陳宇江; 郭飛飛; 葛鑫; 汪璐璐; 王小競 軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點實驗室; 國家口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心; 陜西省口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心; 第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院兒童口腔科; 陜西西安710032

關(guān)鍵詞:乳牙根吸收 成牙骨質(zhì)細(xì)胞 

摘要:目的:檢測釉基質(zhì)蛋白(EMD)誘導(dǎo)乳牙生理性根吸收不同時期的牙周膜干細(xì)胞(PDLSCs)向成牙骨質(zhì)細(xì)胞方向分化的能力及礦化相關(guān)蛋白表達(dá)水平的變化.方法:選取根吸收早期(E組)、中晚期(M組)的乳牙和恒前磨牙(P組)作為組織來源,并分離培養(yǎng)其PDLSCs;然后再將各組PDLSCs分為2個亞組:實驗組用含100mg/mLEMD的DMEM誘導(dǎo)培養(yǎng),對照組用DMEM培養(yǎng);并于誘導(dǎo)7d后檢測各組細(xì)胞中CAP、CEMP-1及BSP、OCN、ALP、COL-1表達(dá)水平的差異.結(jié)果:各組細(xì)胞經(jīng)EMD誘導(dǎo)培養(yǎng)7d后,實時定量PCR檢測結(jié)果顯示,與對照組相比,各實驗組PDLSCs中BSP、ALP、COL-1的表達(dá)水平均顯著上調(diào)(P〈0.05),升高幅度為P組〉E組〉M組;P、E、M各實驗組PDLSCs中CAP、CEMP-1mRNA的表達(dá)水平為P組〉E、M組(P〈0.05),E組與M組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P〉0.05);BSP、OCN的表達(dá)水平均為P組〉E組〉M組(P〈0.05);ALP的表達(dá)水平為P組〉E、M組(P〈0.05),E組和M組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P〉0.05);COL-1的表達(dá)水平在各實驗組間相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P〉0.05).免疫組化染色結(jié)果顯示,P、E、M各實驗組PDLSCs中BSP、OCN、ALP、COL-1均呈陽性表達(dá),對照組則顯示染色不顯著.結(jié)論:EMD可誘導(dǎo)乳牙PDLSCs向成牙骨質(zhì)細(xì)胞方向分化.隨著乳牙生理性根吸收的進行,乳牙PDLSCs向成牙骨質(zhì)細(xì)胞方向分化的能力及礦化相關(guān)蛋白的表達(dá)水平均逐漸降低.

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