miR-369-3p靶向MMP14調節乳頭狀甲狀腺癌細胞侵襲、遷移和上皮間質轉化的作用
關鍵詞：乳頭狀甲狀腺癌細胞 上皮間質轉化 mmp14
摘要：目的:探究miR-369-3p通過靶向調控MMP14表達,對乳頭狀甲狀腺癌細胞侵襲、遷移和上皮間質轉化(EMT)的影響及作用機制。方法:將人乳頭狀甲狀腺癌B-CPAP細胞分為B-CPAP組、mimic-NC組、miR-369-3p mimic組、pLV-MMP14組、mimic+pLV-MMP14組,mimic-NC組細胞轉染陰性對照mimic(mimic-NC),miR-369-3p mimic組細胞轉染miR-369-3p mimic,pLV-MMP14組細胞轉染MMP14過表達慢病毒,mimic+pLV-MMP14組共轉染miR-369-3p mimic和MMP14過表達慢病毒,RT-PCR檢測miR-369-3p和MMP14基因表達水平,熒光素酶報告實驗檢測miR-369-3p和MMP14的靶向關系,Transwell法檢測細胞侵襲,劃痕法檢測細胞遷移,Western blot檢測MMP14、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表達水平。結果:與B-CPAP組比較,miR-369-3p mimic組miR-369-3p表達水平升高,MMP14基因表達水平降低。同時在熒光素酶報告實驗中,與MMP14 WT組比較,MMP14 WT+miR-369-3p mimic組熒光素酶活性顯著降低。同時,與B-CPAP組比較,miR-369-3p mimic組侵襲和遷移能力顯著降低,并且MMP14、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表達水平均顯著降低,E-cadherin蛋白表達水平顯著升高;pLV-MMP14組侵襲和遷移能力顯著升高,并且MMP14、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表達水平顯著升高,E-cadherin蛋白表達水平顯著降低。與pLV-MMP14組比較,mimic+pLV-MMP14組侵襲和遷移能力顯著降低,同時MMP14、N-cadherin、Vimentin、Twist、EGFR、p-ERK1/2、VEGF、MMP2蛋白表達水平均顯著降低,E-cadherin蛋白表達水平顯著升高。結論:miR-369-3p可通過沉默MMP14,阻斷EGFR-ERK信號通路使VEGF、MMP2蛋白表達水平降低,進而抑制乳頭狀甲狀腺癌細胞的侵襲、遷移和上皮間質轉化。
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