棉花DNA甲基轉移酶GhDMT9抗逆性分析
關鍵詞：陸地棉 ghdmt9 生物信息學分析 vigs沉默 超表達
摘要：為探究GhDMT9基因的功能,深入了解DNA甲基轉移酶在植物表觀遺傳方面的作用及其作用機制,利用PCR技術從陸地棉TM-1中克隆GhDMT9基因,構建pYL156:GhDMT9VIGS沉默載體并侵染棉花;構建PBI121:GhDMT9過表達載體轉染擬南芥。生物信息學分析結果為:GhDMT9蛋白質相對分子質量為57691.44kDa,等電點為5.45,總平均親水性是-0.359,不存在跨膜結構域。GhDMT9是一種具有親水能力的酸性穩定蛋白,不是分泌型蛋白,不能在細胞中發生遷移。二級結構預測顯示含有α螺旋(29.61%)、無規則卷曲(45.29%)、延伸鏈(19.22%)、β-轉角(5.88%)。干旱和鹽脅迫處理VIGS沉默GhDMT9基因的棉花幼苗出現明顯的表型差異。實時熒光定量PCR的表達模式分析結果表明:干旱和鹽脅迫處理pYL156:GhDMT9侵染過的棉花與對照相比,GhDMT9的轉錄水平明顯降低。干旱和鹽處理轉GhDMT9基因的擬南芥T3代幼苗葉片失水、發黃、長勢較弱。棉花幼苗沉默GhDMT9基因后與對照相比耐鹽性降低,過表達GhDMT9基因的擬南芥與野生型的擬南芥相比耐鹽性降低。上述結果表明GhDMT9基因在棉花響應脅迫過程中發揮重要作用,為進一步研究棉花的抗逆機制,挖掘功能基因奠定基礎。
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