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Smad2/3a對斑馬魚神經嵴細胞標記基因crestin表達的影響

李麗芳; 陳露西; 賈順姬; 顏光玗 南方醫科大學基礎醫學院; 發育生物學教研室; 廣州510515; 清華大學生命科學學院; 膜生物學國家重點實驗室; 北京100084

關鍵詞:斑馬魚 神經嵴細胞 crestin 

摘要:目的 探討Smad2/3a對脊椎動物神經嵴細胞發育的影響。方法 通過在斑馬魚胚胎單細胞時期顯微注射smad2/3嗎啉環修飾的反義寡核苷酸的方法,特異性敲降smad2/3基因的表達,至胚胎發育至6體節,利用整胚原位雜交檢測神經嵴細胞特異性標記基因snail1b,sox10,foxd3和crestin的表達情況;通過casmad2 mRNA和smad3a mRNA顯微注射的方法過表達smad2和smad3a,同樣利用整胚原位雜交檢測神經嵴細胞特異性標記基因crestin的表達情況;通過過表達casmad2及smad3a對下調smad2和smad3a的胚胎進行挽救。結果 smad2/3a被敲低后,crestin的表達量顯著降低,而snail1b,sox10和foxd3的表達量無明顯變化。smad3b被敲低后,crestin,snail1b,sox10和foxd3的表達量均無明顯變化;過表達casmad2和smad3a均可導致crestin的表達量增高;過表達casmad2和smad3a可挽救由于smad2/3a敲降所造成crestin的低表達量。結論 Smad2和Smad3a對神經嵴細胞標記基因crestin的表達具有重要作用。

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