基于表達熒光蛋白的海分枝桿菌感染斑馬魚模型的抗結核藥物評價方法的研究
關鍵詞：斑馬魚 抗結核藥 藥物評價 重組海分枝桿菌 熒光像素計數法
摘要：目的為了提高基于熒光檢測的海分枝桿菌-斑馬魚感染模型的靈敏度和準確度,我們構建了毒力較弱的可以表達紅色熒光蛋白的重組菌Mm927-pR2HYG,建立了斑馬魚感染模型,用于抗結核藥物的藥效評價和篩選。方法重組菌Mm927-pR2HYG經受精卵卵黃囊注射感染斑馬魚幼魚,通過測定斑馬魚致死率確定其對斑馬魚的感染性,并在激光共聚焦顯微鏡下觀察其在斑馬魚體內的分布。同時應用熒光像素計數法對異煙肼和利福平的治療效果進行評價。結果成功構建了表達熒光蛋白的重組海分枝桿菌Mm927-pR2HYG感染斑馬魚模型。異煙肼和利福平兩種抗結核藥物在該模型中均具有良好的治療作用;應用熒光像素計數法和qPCR計數法進行的藥效評價結果具有較好的一致性。結論重組海分枝桿菌Mm927-pR2HYG感染斑馬魚模型結合熒光像素計數法是一種快速、高效、直觀的藥物體內評價系統,可以用于抗結核藥物的高通量篩選。
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