模擬微重力誘導小鼠成骨細胞微絲變化對堿性磷酸酶及骨鈣蛋白的影響
關鍵詞：失重模擬 成骨細胞 細胞骨架 堿性磷酸酶 骨鈣素
摘要：目的 研究模擬微重力誘導小鼠成骨細胞微絲結構改變對堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）及骨鈣蛋白（osteocalcin,OCN）的影響,探討失重導致骨質疏松的機制.方法本研究以已建株的小鼠成骨樣細胞株（MC3T3-E1）作為對象,以回轉器模擬微重力效應.實驗將細胞分為4組：模擬微重力組、0.5 μg/ml細胞松弛素B組、模擬微重力＋0.5 μg/ml細胞松弛素B組及正常重力組（對照組）.培養48 h后,利用異硫氰酸熒光素鬼筆環肽（fluoresceine isothiocyanate phalloidin,FITC-phalloidin）進行免疫熒光染色,在激光共聚焦顯微鏡下觀察各組細胞微絲的變化;同時用ALP試劑檢測各組細胞培養液內ALP的酶活性,采用ELISA法檢測各組細胞裂解液中OCN的表達量.結果 除正常重力組外,其余各組細胞微絲結構都出現了不同程度的解聚,張力纖維減少,失去方向性,以模擬微重力＋0.5 μg/ml細胞松弛素B組改變最為明顯.和正常重力組比較,其余各組ALP的酶活性和OCN的表達量均成下降趨勢（F=17.23、121.91,P〈0.01）,且模擬微重力＋0.5 μg/ml細胞松弛素B組與模擬微重力組和0.5 μg/ml細胞松弛素B組這兩組之間的差別都有統計學意義（P〈0.05）.結論 微重力影響成骨細胞ALP的酶活性及OCN的表達可能與微重力誘導細胞骨架微絲解聚相關.
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