RNA干擾PDGF-B基因?qū)δz質(zhì)瘤U251細胞凋亡和增殖的影響
關(guān)鍵詞：u251膠質(zhì)瘤細胞 血小板源生長因子 rna干擾
摘要：目的利用RNA干擾（RNA interference,RNAi）技術(shù)特定沉默膠質(zhì)瘤U251細胞株的血小板源生長因子-B（PDGF-B）基因,觀察其對U251細胞株細胞凋亡和增殖的影響。方法利用脂質(zhì)體將針對PDGF-B基因的siRNA轉(zhuǎn)染進入U251細胞,利用實時熒光定量多聚核苷酸鏈式反應(yīng)（RTPCR）檢測PDGF-B基因表達;Western blot檢測顯示siRNA轉(zhuǎn)染組PDGF-B蛋白表達,采用MTT法檢測膠質(zhì)瘤U251細胞的增殖,應(yīng)用流式細胞計數(shù)觀察抑制PDGF-B基因后膠質(zhì)瘤U251細胞的凋亡情況。結(jié)果 RT-PCR檢測PDGF-B基因表達明顯下降;Western blot檢測顯示siRNA轉(zhuǎn)染組PDGF-B蛋白表達明顯抑制（抑制率〉60%）,MTT結(jié)果顯示siRNA轉(zhuǎn)染組U251細胞增殖較對照組明顯降低;流式細胞學(xué)檢測提示降低PDGF-B在膠質(zhì)瘤細胞的表達能抑制膠質(zhì)瘤細胞的有絲分裂,促進細胞的凋亡。結(jié)論構(gòu)建針對膠質(zhì)瘤細胞PDGF-B的RNA干擾質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染人膠質(zhì)瘤U251細胞株后,可明顯抑制U251細胞株P(guān)DGF的表達,對人膠質(zhì)瘤U251細胞株有明顯的生長抑制和促進凋亡作用。
中華神經(jīng)外科疾病研究雜志要求:
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