關鍵詞:組織工程 膠原 殼聚糖 血管化 機械強度
摘要:目的觀察聚乳酸.羥基乙酸(PLGA)編織網/膠原-殼聚糖多孔支架(PCCS)對血管化的影響,探討其相關機制。方法(1)采用冷凍-凍干法制備PCCS和膠原-殼聚糖支架(CCS),對比觀察PCCS、PLGA編織網及CCS的微觀形態及吸水能力。(2)取PCCS與CCS樣本,分別植入24只SD大鼠脊柱兩側皮下,按照隨機數字表法將大鼠分成3批,于術后1、2、4周分批處死大鼠,采集埋植部位皮膚標本,行組織病理學、免疫組織化學檢測;采用實時定最RT—PCR檢測其α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)與血管內皮生長因子(VEGF)的mRNA表達水平。對數據進行t檢驗。結果(1)PLGA編織網與膠原-殼聚糖海綿緊密結合,形成的PCCS具有與CCS相類似的三維多孔結構。(2)PCCS的吸水率為(506±15)%,顯著高于PLGA編織網的(195±15)%,明顯低于CCS的(627±21)%,t值分別為11.9、3.8.P〈0.05或P〈0.001。(3)CCS4周左右完成支架全層的組織長人,PCCS僅用2周完成這一過程且形成的新生膠原更加豐富、分布均勻。(4)隨著埋植時間的延長,2種支架的血管逐漸由支架劇圍向支架內部長人。術后1、2、4周,PCCS中血管計數依次為(10.7±3.2)、(18.6±2.1)、(30.3±4.5)條/mm2,明昆高于CCS的(5.4±0.9)、(10.8±4.2)、(23.6±1.7)條/mm2,t值分別為4.6、4.4和4.5,P值均小于0.01。(5)術后各時相點PCCS中α-SMA與VEGF的mRNA表達水平均高于CCS(t值分別為1.26、1.63、2.17與5.52、2.07、1.78,P值均小于0.01)。結論PCCS能夠快速誘導血管長入并促進血管成熟,其中支架的機械支撐作用與三維多孔結構具有重要協同作用。
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