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番木瓜環(huán)斑病毒西瓜株系弱毒突變體的篩選與應(yīng)用

黃顯德; 王玉; 閆志勇; 耿超; 田延平; 李向東 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院植物病毒研究室; 泰安271018

關(guān)鍵詞:番木瓜環(huán)斑病毒 弱毒突變體 葫蘆科作物 交叉保護(hù) 

摘要:為防治番木瓜環(huán)斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)在我國(guó)葫蘆科作物上引起的病毒病害,以PRSV西瓜株系山東分離物(PRSV-SD)侵染性cDNA克隆為基礎(chǔ),采用定點(diǎn)突變方法將輔助成分-蛋白酶保守氨基酸137位和346位的天冬酰胺(N)和417位的纈氨酸(V)突變?yōu)楸彼?A),應(yīng)用農(nóng)桿菌浸潤(rùn)法接種西葫蘆葉片并分析突變對(duì)PRSV-SD致病力的影響,篩選弱毒突變體,進(jìn)而評(píng)價(jià)其交叉保護(hù)效果。結(jié)果表明,與野生型PRSV-SD相比,獲得的3個(gè)突變體N137A、N346A和V417A,接種后在西葫蘆植株上的癥狀明顯減輕,衣殼蛋白在葉片中的積累水平分別為野生型PRSV-SD的24.0%、13.0%和4.0%,均為弱毒突變體。當(dāng)保護(hù)間隔期為10 d時(shí),弱毒突變體N137A具有完全的交叉保護(hù)效果,N346A可延遲發(fā)病15 d,而V417A無(wú)交叉保護(hù)效果。當(dāng)間隔保護(hù)期為15 d時(shí),弱毒突變體N137A和N346A的保護(hù)效率分別為100.0%和26.7%,而V417A無(wú)交叉保護(hù)效果。

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